动物模型的设计原则
适用性和可控性
供医学实验研究用的动物模型,在时,应尽量考虑到今后临床应用和便于控制其疾病的发展,以利于研究的开展。如雌能终止大鼠和小鼠的早期,但不能终止人的。因此,选用雌大鼠和小鼠终止早期的模型是不适用的,因为在大鼠和小鼠筛选带有雌活性的时,常常会发现这些能终止,似乎可能是有效的避孕药,但一旦用于人则并不成功。所以,如果知道一个化合物具有雌活,用这个化合物在大鼠或小鼠观察终止的作用是没有意义的。又如选用大小鼠作作实验性腹膜炎就不适用,因为它们对革兰氏阴性细菌具有较高的抵抗力,很不容易造成腹膜炎。有的动物对某致病因子特别敏感,极易,也不适用。将几种不同的应激因子在实验全程中应用,顺序随机,使动物不能预料刺激的发生。如狗腹腔注she粪便滤液引起腹膜炎很快( 80%24 小时内),来不及做实验观察,而且粪便剂量及细菌菌株不好控制,因此不能准确重复实验结果。
根据GB19489-2004实验室 生物 安全通用要求,动物实验室的 生物 安全要点:
动物实验室的生物安全防护设施应参照BSL1-4实验室的要求,还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验(如染毒、医学检查、取样、解剖、检验等)、动物饲养、动物及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。应特别注意对动物源性气溶胶的防护,例如对动物的剖检应在负压剖检台上进行。(三)慢性不可预见性应激模型大鼠经历一系列严重的应激因子(如噪声、强光刺激、长时间行为限制等)后表现出活动能力下降。
应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平的、于动物的、符合国家相关标准的 生物安全柜 、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。
实验室建筑应确保实验动物不能逃逸,非实验室动物(如野鼠、昆虫等)不能进入。实验室设计(如空间、进出通道等)应符合所用动物的需要。
动物实验室空气不应循环。动物源气溶胶应经适当的过滤/消毒后排出,不能进入室内循环。
如动物需要饮用无菌水,供水系统应可安全消毒。
动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合国家相关标准的要求。
1 被动吸烟模型
(1)方法 实验豚鼠(雌雄不限),将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中,每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次,1次/d,5d/周,连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查),即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。
(2)模型特点 本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能恢复正常。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关;2雌多囊卵chao综合征动物模型方法选用未交配雌性成年大鼠,一次性注射戊酸雌二醇2mg/只,16~20d后大鼠上皮出现持续角化。因模型时间较长,实验过程中影响因素较多,模型的稳定性相对较差。
2 蛋白酶模型
(1)方法 成年大鼠(雌雄不限),经yi醚后仰卧固定头部及四肢,轻拉鼠舌,压迫舌腹,在额镜直视下,趁大鼠呼吸瞬间,迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处,随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液,注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。(2)模型特点本模型病理表现为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能恢复正常。
(2)模型特点 大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理组织学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟,使尾部血管充盈,可采到较多的血,但注意二可致溶血。
zi宫腺肌病小鼠的yao物疗xiao及其疼痛机制
目的:了解腺肌病小鼠的药wuzhi疗liao效及疼痛机制。
方法:他莫昔芬法建模。以不同yao物zhi疗后,监测小鼠动情周期,检测5-HT、GnRH-R、NGF、NF的水平。
结果:对照组5-HT水平明显高于造模组。GnRH-R及NGF在正常内膜、在位内膜的表达显著低于异位内膜。NF在正常内膜的表达显著低于在位内膜、异位内膜。
结论:与全量抑那通相似,半量抑那通可减缓腺肌病进展,但对动情周期影响无明显优势。全量抑那通后使用达英-35可巩固疗xiao。5-HT可能在腺肌病疼痛机制中发挥作用。